紫外可见分光光度计的用途

   日期:2019-04-22     来源:中国仪器网    作者:仪器信息网    浏览:7771    评论:0    
核心提示:  紫外可见分光光度计的运用十分广泛。它能用于无机、有机化合物的定量分析及配合物的组成和稳定常数的测定,还能用于有机化合物的鉴定、结构分析及同分异构体的鉴定。  1、光度测量  在食品生产中为了保证有

  紫外可见分光光度计的运用十分广泛。它能用于无机、有机化合物的定量分析及配合物的组成和稳定常数的测定,还能用于有机化合物的鉴定、结构分析及同分异构体的鉴定。

  1、光度测量

  在食品生产中为了保证有颜色的饮料(如可乐、果汁及茶饮料)产品的颜色一致,可以在可见光区用紫外可见分光光度计来测定其吸光度值,使色差符合产品要求。在发酵业中也可通过测定吸光度值来确定产品的发酵完成程度。对于一些成分比较单一的产品也可通过测定吸光度值来确定产品合格与否。比如,判定营养增强剂维生素B1的质量就可以在400nm下测定其吸光度值,当其值不超过0.020时,即可确定为合格品。

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  2、成分的定性分析

  物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子原子和不同的分子空间结构,其吸收光熊量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特性波长处的最大吸收峰(峰值)和波形图来判断某种物质是否存在。

  在食品生产中会使用一些食品添加剂,为了确定食品添加剂的质量,可以用紫外可见分光光度计对其进行光谱扫描。例如,对食品中涉及的一些复合甜味剂、复合防腐剂和复合鲜味剂等就可以用紫外可见分光光度计进行一个全面扫描以排除违禁添加剂的使用。另外,此方法还可以在物质结构分析方面作为红外光谱(IR)、核磁共振((NMR)、质谱(MS)等方法的辅助手段。

  3、成分的定量分析

  对于食品卫生安全检测中一些含量需要严格控制的成分项目可以用紫外可见分光光度计来准确检测。食品中常用紫外可见分光光度计测定。

  4、DNA/蛋白分析

  DNA/蛋白质为生物大分子,所产生的紫外光吸收往往是其分子内的小基团所引起的,例如嘌呤碱、嘧啶碱、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和肽键等。嘌呤碱、嘧啶碱以及由它们参与组成的核昔、核苷酸及核酸对紫外光有强烈的吸收,在吸收波长260nm处有最大吸收值。

  在蛋白质分子中,酪氨酸(TYR)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸((Trp)残基的苯环含有共扼双键,该共扼双键对紫外光有吸收(其中最大吸收Tyr在吸收波长274nm;Phe在吸收波长257nm;Trp在吸收波长280nm),从而导致蛋白质对紫外光有吸收。肽键对紫外光的最大吸收在吸收波长238nm。紫外可见分光光度计利用这个特性可以准确、可靠地测定乳制品中蛋白质含量。

  5、核酸分析工作中的用途

  紫外可见分光光度计在氨基酸分析中的应用,主要是用来对氨基酸的定量检测。因为氨基酸对紫外光的主要吸收波长为230nm,所以,我们只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO到氨基酸的最大吸收峰230nm而计算出氨基酸的含量。

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  但是,因为氨基酸分析时,一般是将它溶解在水中,而水在230nm附近有很多干扰吸收线,所以,在用紫外可见分光光度计对氨基酸分析检测时,要注意防止干扰的问题。此外,还需注意:只有少数氨基酸有紫外吸收,多数氨基酸无紫外吸收或很弱,测定时要衍生化后再测。

  6、糖类分析测试工作中的用途

  紫外可见分光光度计在糖的分析中,主要是作定量检测。因为糖对紫外光的主要吸收波长为218nm,所以,对糖类进行分析时,只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO到氨基酸的最大吸收峰218nm就可测试其吸光度大小,从而计算出糖的含量。


 
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